制限酵素のバッファー

制限酵素は適した組成（塩の種類や塩濃度）のバッファーで反応しなければならない。適した組成でない場合、反応速度が低下するだけでなく、塩基の認識が不正確になることもあるので注意しなければいけない(スター活性)。試薬を提供するベンダーによって、バッファーの組成が同一であることもあれば異なる場合もある。主なバッファーとして、NaCl濃度の異なるもの・塩としてKClを用いたもの・塩化物イオンを酢酸イオンにしたものがある。この他、塩濃度を微調節したものやBSAや界面活性剤を添加したものがある。制限酵素によっては、専用のバッファーを使わなければいけないものもある。

各社の類似したバッファー

低塩濃度バッファー

Takara	L	10mM Tris-HCl	7.5	none	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
日本ジーン	L	10mM Tris-HCl	7.5	none	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
NEB	1	10mM Bis-Tris-HCl	7.0	none	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
Fermentas	B	10mM Tris-HCl	7.5	none	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Invitrogen	REact1	50mM Tris-HCl	8.0	none	10mM MgCl₂	-	-
Promega	A	6mM Tris-HCl	7.5	6mM NaCl	6mM MgCl₂	1mM DTT	-

中塩濃度バッファー

Takara	M	10mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
日本ジーン	M	10mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
NEB	2	10mM Tris-HCl	7.9	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
Fermentas	G	10mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Invitrogen	REact2	50mM Tris-HCl	8.0	50mM NaCl	10mM MgCl₂	-	-
Promega	C	10mM Tris-HCl	7.9	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-

高塩濃度バッファー

Takara	H	50mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
日本ジーン	H	50mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
NEB	3	50mM Tris-HCl	7.9	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
Fermentas	O	50mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Invitrogen	REact3	50mM Tris-HCl	8.0	100mM NaCl	10mM MgCl₂	-	-
Promega	E	6mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	6mM MgCl₂	1mM DTT	-

KClバッファー

Takara	K	20mM Tris-HCl	8.5	100mM KCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
Fermentas	R	10mM Tris-HCl	8.5	100mM KCl	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Invitrogen	6	50mM Tris-HCl	7.4	50mM KCl/50mM NaCl	6mM MgCl₂	-	-
Promega	J	10mM Tris-HCl	7.5	50mM KCl	7mM MgCl₂	1mM DTT	-

酢酸塩バッファー

Takara	T	33mM Tris-OAc	7.9	66mM KOAc	10mM MgOAc₂	0.5mM DTT	-
日本ジーン	A	20mM Tris-OAc	7.9	50mM KOAc₂	10mM MgOAc	1mM DTT	-
NEB	4	20mM Tris-OAc	7.9	50mM KOAc	10mM MgOAc₂	1mM DTT	-
Fermentas	Y	33mM Tris-OAc	7.9	66mM KOAc	10mM MgOAc₂	-	0.1mg/mL

各社のバッファー

Takara

タカラバイオ(TaKaRa BIO)

Name	Property	buffer	pH	salt	metal ion	reducer
L	Low salt	10mM Tris-HCl	7.5	none	10mM MgCl₂	1mM DTT
M	Mid salt	10mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT
H	High salt	50mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT
K	KCl salt	20mM Tris-HCl	8.5	100mM KCl	10mM MgCl₂	1mM DTT
T	TrisOAC	33mM Tris-OAc	7.9	66mM KOAc	10mM MgOAc₂	0.5mM DTT

日本ジーン

(Nippon gene)

Name	Property	buffer	pH	salt	metal ion	reducer
L	Low salt	10mM Tris-HCl	7.5	none	10mM MgCl₂	1mM DTT
M	Mid salt	10mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT
H	High salt	50mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT
A	Aceticacid	20mM Tris-OAc	7.9	50mM KOAc	10mM MgOAc₂	1mM DTT
B	Basic pH	10mM Tris-HCl	8.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT

NEB

(New England Biolab)

Name	Property	buffer at 25ºC	pH	salt	metal ion	reducer
1	Low salt	10mM Bis-Tris-HCl	7.0	none	10mM MgCl₂	1mM DTT
2	Mid salt	10mM Tris-HCl	7.9	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT
3	High salt	50mM Tris-HCl	7.9	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT
4	AcO-salt	20mM Tris-OAc	7.9	50mM KOAc	10mM MgOAc₂	1mM DTT

Fermentas

Name	Property	buffer	pH	salt	metal ion	reducer	other
Blue	Low salt	10mM Tris-HCl	7.5	none	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Green	Mid salt	10mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Orange	High salt	50mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Red	KCl	10mM Tris-HCl	8.5	100mM KCl	10mM MgCl₂	-	0.1mg/mL BSA
Yellow	AcO-salt	33mM Tris-OAc	7.9	66mM KOAc	10mM MgOAc₂	-	0.1mg/mL

Invitrogen

Name	Property	buffer	pH	salt	metal ion	reducer(*)	other
1	Low salt	50mM Tris-HCl	8.0	-	10mM MgCl₂	-	-
2	Mid salt	50mM Tris-HCl	8.0	50mM NaCl	10mM MgCl₂	-	-
3	High salt	50mM Tris-HCl	8.0	100mM NaCl	10mM MgCl₂	-	-
4	KCl	20mM Tris-HCl	7.4	50mM KCl	5mM MgCl₂	-	-
6	KCl/NaCl	50mM Tris-HCl	7.4	50mM KCl/50mM NaCl	6mM MgCl₂	-	-
7	KCl/NaCl	50mM Tris-HCl	8.0	50mM KCl/50mM NaCl	10mM MgCl₂	-	-
8	Low salt	20mM Tris-HCl	7.4	-	10mM MgCl₂	-	-
9	High salt	100mM Tris-HCl	7.6	150mM NaCl	10mM MgCl₂	-	-

(*)10mM DTT別添付

Promega

Name	Property	buffer at 37ºC	pH	salt	metal ion	reducer	other
A	Low salt	6mM Tris-HCl	7.5	6mM NaCl	6mM MgCl₂	1mM DTT	-
B	Mid salt	6mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	6mM MgCl₂	1mM DTT	-
C	Mid salt	10mM Tris-HCl	7.9	50mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
D	High salt	6mM Tris-HCl	7.9	150mM NaCl	6mM MgCl₂	1mM DTT	-
E	High salt	6mM Tris-HCl	7.5	100mM NaCl	6mM MgCl₂	1mM DTT	-
F	High salt	10mM Tris-HCl	8.5	100mM NaCl	10mM MgCl₂	1mM DTT	-
G	Base pH	50mM Tris-HCl	8.2	-	5mM MgCl₂	-	-
H	Strong buffering	90mM Tris-HCl	7.5	50mM NaCl	10mM MgCl₂	-	-
J	Mid KCl	10mM Tris-HCl	7.5	50mM KCl	7mM MgCl₂	1mM DTT	-
K	High KCl	10mM Tris-HCl	7.4	150mM KCl	10mM MgCl₂	-	-
L	Base/High salt	10mM Tris-HCl	9.0	100mM NaCl	3mM MgCl₂	-	-

リンク

ご注意

最新で正確な情報にするよう努力していますが、それを保証するものではありません。使用の際は各社の最新のマニュアル等を参照してください。

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